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本试剂盒适用于从多种植物中提取RNA，即便是从多糖多酚含量丰富的植物中也能成功提取高质量的RNA，如水稻叶片、小麦叶片、玉米叶片、烟草叶、松针、银杏叶、杨树叶、石榴叶、冬青叶、苹果、桃、梨、西红柿、樱桃、杏、香蕉、葡萄、枇杷、桂圆果皮、桂圆果肉、荔枝果皮、荔枝果肉、大豆、花生、玉米、马铃薯块茎、月季花瓣、石榴花瓣，香菇、平菇等样本。独特的裂解液配方，可使细胞中的RNA酶迅速灭活，有效去除多糖多酚对RNA提取的影响，无需苯酚、氯仿等试剂，同时采用硅基质膜吸附RNA进行纯化，提取的总RNA纯度高，无基因组、蛋白质和其它杂质的污染，可用于Real Time RT-PCR、RT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、和体外翻译等多种下游实验。

• 预防RNase污染，应注意以下几方面：
  
  • 使用无RNase的塑料制品和枪头。
    
  • 操作人员戴一次性口罩和手套，实验过程中要勤换手套。
• 提取的样品避免反复冻融，否则影响RNA提取得率和质量。
  
• Buffer RLS如果产生沉淀，请加热使其溶解后室温放置。
  
• Buffer RLS在使用前请加入β-巯基乙醇，1mL Buffer RLS加20μL β-巯基乙醇。加入β-巯基乙醇的Buffer RLS室温可保存1个月。
  
• 第一次使用Buffer RW2前应按照试剂瓶标签的说明加入无水乙醇。

• 匀浆处理：取50～100mg植物组织在液氮中迅速研磨成粉末，加入500μL Buffer RLS（使用前请先检查是否加入β-巯基乙醇），立即涡旋剧烈震荡混匀。
  注意：对于含水量极其丰富的材料，如西瓜果肉，西红柿，梨果肉等，可以适当多加入些材料，最多可增加至200mg；对于富含淀粉的样本或成熟叶片，可适当增加Buffer RLS的用量，最多可增加至700μL。
  
• 4℃ 12000rpm（~13400×g）离心2分钟。
  
• 将上清液转入已装入收集管的过滤柱FS中，4℃ 12000rpm离心1分钟，小心吸取收集管中的上清并转移至新的RNase-Free离心管（自备）中，枪头尽量避免接触收集管中的细胞碎片沉淀。
  
• 缓慢加入0.5倍上清体积的无水乙醇，混匀（此时可能会出现沉淀），将得到的溶液和沉淀一起转入已装入收集管的吸附柱RM中，若一次不能将全部溶液加入吸附柱中，请分两次转入。4℃ 12000rpm离心1分钟，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中。
  
• 向吸附柱RM中加入350μL Buffer RW1，4℃ 12000rpm离心1分钟，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中。
  
• 配制DNase I混合液：取52μL RNase-Free Water，向其中加入8μL 10×Reaction Buffer和20μL DNase I（1U/μL），混匀，配制成终体积为80μL的反应液。
  
• 向吸附柱中直接加入80μL DNase I混合液，20～30℃孵育15分钟。
  
• 向吸附柱RM中加入350μL Buffer RW1，4℃ 12000rpm离心1分钟，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中。
  
• 向吸附柱RM中加入500μL Buffer RW2（使用前检查是否加入无水乙醇）,4℃ 12000rpm离心1分钟，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中。
  
• 重复步骤9。
  
• 4℃ 12000rpm离心2分钟。
  注意：这一步的目的是将吸附柱中残余乙醇去除，乙醇残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
  
• 将吸附柱RM装入新的RNase-Free离心管（1.5mL）中，向吸附膜的中间部位悬空滴加30～50μL RNase-Free Water，室温放置2分钟，4℃ 12000rpm离心1分钟，得到的RNA溶液保存在-70℃，防止降解。
  注意：
  ① RNase-Free Water体积不应小于30μL，体积过小影响回收率。
  ② 如果要提高RNA的产量，可用30～50μL新的RNase-Free Water重复步骤12。
  ③ 如果要提高RNA浓度，可将得到的溶液重新加入到吸附柱中，重复步骤12。